戊型病毒性肝炎診斷標準及處理原則――附錄B
發布時間：2011-08-26 共1頁
戊型肝炎的病原血清學診斷試劑
目前尚不能在組織培養上獲取供診斷用的病毒抗原、化學合成抗原肽和cDNA重組抗原。兩者組裝的EIA試劑在檢測抗HEV－IgG時敏感性和特異性相似。
B1 化學合成寡肽抗原，由位于第二讀碼框架3′端的B細胞表位決定簇的42個氨基酸和第三讀碼框架的3′端的33個氨基酸組成，對第一讀碼框架的依賴于RNA的RNA聚合酶區的部分氨基酸也有合成。此三個讀碼框架中以第二、三讀碼框架為優勢表位決定簇，一框架的聚合酶片段較差。
B2 CDNA重組抗原：用原核細胞分別表達的第二、三讀碼框架的3′端編碼多肽，證明具有抗原性，可用作組裝診斷試劑盒的抗原材料，將第二、三讀框的B細胞表位決定簇片段嵌合表達可得嵌合多肽，對第二、三讀框都有抗原反應，并且抗原性較分別表達的肽段強。當前國內外檢測戊型肝炎均用EIA.其基本原理是：
在聚苯乙烯板孔內在堿性條件下包被純化的戊肝抗原，飽和吸附后洗凈未結合的抗原，加待檢血清標本（1∶20稀釋）洗凈，加入由辣根過氧化物酶標記的抗人IgG抗體（如檢測IgG則加標記的抗人IgG，如檢測IgM型抗體則加抗人μ鏈抗體）如果血清中抗HEV陽性，標記抗體可與抗HEV結合，溫育，洗凈后加OPD底物顯橙黃色，在492nm波長下光吸收值（OD值）越大表示陽性強度越大，無色則表示陰性反應。其陽性判定值各廠家產品均有說明。操作方法及注意事項均有說明，在此不多述。
抗HEV－IgM在疾病的早期出現，可作為HEV病原分型診斷的重要判定標準，從初步的臨床檢測結果看HEV－IgM的反應強度低于甲型肝炎，持續的時間也較短。因此在病人入院時立即采血做1∶50稀釋檢測抗HEV－IgM，最晚不能遲于發病后半個月，因抗HEV滴度較低，故凡抗HEV－IgM陽性應檢測類風濕因子，如類風濕因子陽性同時抗HEV－IgM陽性時應再進一步稀釋血清進行驗證，如抗HEV－IgM仍陽性類風濕因子陰性，診斷成立。亦可先用抗人IgG與待檢血清預先中和，仍能檢出IgM則可判為抗HEV－IgM陽性。當前所用的間接IgM檢測法特異性較捕捉法差，有待進一步改進。整理
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目前尚不能在組織培養上獲取供診斷用的病毒抗原、化學合成抗原肽和cDNA重組抗原。兩者組裝的EIA試劑在檢測抗HEV－IgG時敏感性和特異性相似。
B1 化學合成寡肽抗原，由位于第二讀碼框架3′端的B細胞表位決定簇的42個氨基酸和第三讀碼框架的3′端的33個氨基酸組成，對第一讀碼框架的依賴于RNA的RNA聚合酶區的部分氨基酸也有合成。此三個讀碼框架中以第二、三讀碼框架為優勢表位決定簇，一框架的聚合酶片段較差。
B2 CDNA重組抗原：用原核細胞分別表達的第二、三讀碼框架的3′端編碼多肽，證明具有抗原性，可用作組裝診斷試劑盒的抗原材料，將第二、三讀框的B細胞表位決定簇片段嵌合表達可得嵌合多肽，對第二、三讀框都有抗原反應，并且抗原性較分別表達的肽段強。當前國內外檢測戊型肝炎均用EIA.其基本原理是：
在聚苯乙烯板孔內在堿性條件下包被純化的戊肝抗原，飽和吸附后洗凈未結合的抗原，加待檢血清標本（1∶20稀釋）洗凈，加入由辣根過氧化物酶標記的抗人IgG抗體（如檢測IgG則加標記的抗人IgG，如檢測IgM型抗體則加抗人μ鏈抗體）如果血清中抗HEV陽性，標記抗體可與抗HEV結合，溫育，洗凈后加OPD底物顯橙黃色，在492nm波長下光吸收值（OD值）越大表示陽性強度越大，無色則表示陰性反應。其陽性判定值各廠家產品均有說明。操作方法及注意事項均有說明，在此不多述。
抗HEV－IgM在疾病的早期出現，可作為HEV病原分型診斷的重要判定標準，從初步的臨床檢測結果看HEV－IgM的反應強度低于甲型肝炎，持續的時間也較短。因此在病人入院時立即采血做1∶50稀釋檢測抗HEV－IgM，最晚不能遲于發病后半個月，因抗HEV滴度較低，故凡抗HEV－IgM陽性應檢測類風濕因子，如類風濕因子陽性同時抗HEV－IgM陽性時應再進一步稀釋血清進行驗證，如抗HEV－IgM仍陽性類風濕因子陰性，診斷成立。亦可先用抗人IgG與待檢血清預先中和，仍能檢出IgM則可判為抗HEV－IgM陽性。當前所用的間接IgM檢測法特異性較捕捉法差，有待進一步改進。整理
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