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　　摘　要：目的：研制一種新型有效的牙周抗菌制劑，以代替常規(guī)用藥。方法：用瓊脂稀釋法做幾種口腔常見菌對黃總蒽醌和黃酸標(biāo)準(zhǔn)品的敏感性試驗(yàn)。甲殼胺對口腔常見菌的凝集試驗(yàn)。用齲活性試驗(yàn)做甲殼胺對變形鏈球菌的解吸附試驗(yàn)。用鋼管法做黃滴劑對口腔常見菌的抑菌試驗(yàn)。結(jié)果：黃總蒽醌和黃酸標(biāo)準(zhǔn)品對口腔常見菌都有不同程度的抑菌作用。甲殼胺除對齒雙歧外，對其他口腔常見菌均有凝集作用。甲殼胺對變形鏈球菌有解吸附作用。成品黃滴劑對口腔常見菌有抑菌作用。結(jié)論：黃滴劑有明顯抑菌作用。

　　牙周病是由牙菌斑引起的牙齒周圍組織的慢性破壞性疾病，選擇有效的抗菌藥物控制引起牙周病的菌斑，收到明顯療效。但目前治療牙周病的抗菌藥物多局限于抗生素類的化學(xué)制劑，而對中藥的研究甚少。我們利用中藥黃的明顯抗厭氧菌作用和甲殼胺配伍制成中藥黃滴劑，旨在提出一種新的考試，網(wǎng)站收集牙周抗菌制劑。現(xiàn)就其主要實(shí)驗(yàn)室研究報(bào)告如下。

　　1.材料與方法

　　1.1　標(biāo)準(zhǔn)菌株和培養(yǎng)條件

　　1.1.1　標(biāo)準(zhǔn)菌株　選用北京口腔醫(yī)學(xué)研究所微生物室保存的國際標(biāo)準(zhǔn)菌株。牙齦卟啉菌P381和ATCC33277，粘性放線菌ATCC19246，中間型普氏菌ATCC25261，具核梭形菌ATCC10953，伴放線放線桿菌Y4，變形鏈球菌c型和d型，中間型鏈球菌ATCC27335，齒雙歧ATCC27534.

　　1.1.2　培養(yǎng)條件　變形鏈球菌和中間型鏈球菌在MSA培養(yǎng)基中微需氧培養(yǎng)2天，余菌株在CDC培養(yǎng)基中厭氧培養(yǎng)5天。

　　1.2　主要試劑

　　1.2.1　黃總蒽醌　北京制藥研究所提供。

　　1.2.2　黃酸標(biāo)準(zhǔn)品　中國藥品生物制品檢定所，0757-9703。

　　1.2.3　甲殼胺　取比度0.78粘度45cps灰分0.8%。

　　1.2.4　黃滴劑　北京口腔醫(yī)院藥房配制。

　　1.3　實(shí)驗(yàn)方法

　　1.3.1　黃對牙周致病菌的抑菌試驗(yàn)　取黃總蒽醌和黃酸標(biāo)準(zhǔn)品，用瓊脂稀釋法［1］做細(xì)菌敏感性試驗(yàn)。

　　1.3.2　甲殼胺的凝集試驗(yàn)　將各菌接種在相應(yīng)的液體培養(yǎng)基中，內(nèi)含一定濃度的甲殼胺，培養(yǎng)后觀察各菌生長情況。

　　1.3.3　甲殼胺對變形鏈球菌的解吸附試驗(yàn)　用齲活性試驗(yàn)方法，將標(biāo)準(zhǔn)板浸入含變形鏈球菌的液體培養(yǎng)基中，經(jīng)48小時(shí)培養(yǎng)后，將有變形鏈球菌附著的板再浸到含甲殼胺的溶液中，連續(xù)觀察附著的變形鏈球菌從板上的脫落情況。

　　1.3.4　黃滴劑的體外抑菌實(shí)驗(yàn)　取成品黃滴劑，按倍比稀釋的原則，稀釋為原液的100%、50%、25%、12.5%和6.25%用鋼管法分別加入到各菌的菌平皿中，培養(yǎng)后觀察抑菌結(jié)果。

　　2.結(jié)　果

　　2.1　黃抑菌試驗(yàn)測定結(jié)果　黃總蒽醌和黃酸標(biāo)準(zhǔn)品的抑菌效果致相同，除對變形鏈球菌、中間型鏈球菌和伴放線放線桿菌無作用外，對口腔其他常見菌均有作用。對牙齦卟啉菌ATCC33277和中間型普氏菌ATCC25261作用最強(qiáng)，黃總蒽醌濃度在1.4μg/ml，黃酸標(biāo)準(zhǔn)品濃度在4.17μg/ml時(shí)都有抑菌作用。

　　2.2　甲殼胺凝集結(jié)果　甲殼胺除對齒雙歧ATCC27534無凝集作用外，對口腔其他常見菌都有不同程度的凝集作用。

　　2.3　甲殼胺解吸附試驗(yàn)結(jié)果　甲殼胺對附著的變形鏈球考試，網(wǎng)站收集菌有一定解吸附作用，這一作用的最有效濃度是5mg/ml。應(yīng)用甲殼胺后10min開始起作用，60min后使附著的變形鏈球菌完全脫盡。

　　2.4　黃滴劑的體外抑菌實(shí)驗(yàn)結(jié)果　黃滴劑對口腔常見菌有明顯抑菌作用，即使稀釋至原液的1/16仍有作用。

　　3.討　論

　　在我國應(yīng)用黃治療疾病已有悠久的歷史。黃有廣譜抗菌作用，黃中起抗菌作用的有效成分為蒽醌衍生物，而蒽醌衍生物中有抑菌作用的成分為黃酸、黃素和蘆薈黃素。王文風(fēng)等［2］報(bào)告，黃蒽醌衍生物對臨床常見的100株厭氧菌有較強(qiáng)的抑制作用。我們利用黃的明顯抗厭氧菌作用，尤其是對脆弱類桿菌、產(chǎn)黑色素類桿菌敏感的特性，制成中藥抗菌藥物，治療牙周疾病。

　　用瓊脂稀釋法做幾種口腔常見菌對黃總蒽醌和黃酸標(biāo)準(zhǔn)品的敏感性，發(fā)現(xiàn)二者的抑菌效果基本相同，對牙周致病菌都有不同程度的抑制作用，尤其是對牙齦卟啉菌ATCC33277和中間型普氏菌ATCC25261，即使?jié)舛仍?.4μg/ml都有抑菌作用。但黃對變形鏈球菌、中間型鏈球菌和伴放線放線桿菌無抑菌作用，說明對由伴放線放線桿菌引起的青少年牙周炎可能無作用，而對厭氧菌引起的牙周炎作用較好。

　　甲殼胺做為一種生物多糖高分子物質(zhì)，因其可溶性、成膜性、可吸收性和生物相容性，在藥劑中作為填充劑、黏合劑、薄膜包衣材料、緩釋控釋材料等在醫(yī)學(xué)上研究很多［3］。近年來，在口腔方面的應(yīng)用也漸漸受到重視。甲殼胺除對齒雙歧無凝集作用外，對其他口腔常見菌均有凝集作用。這樣，甲殼胺就可把牙周袋內(nèi)的細(xì)菌凝集沉淀在牙周袋的局部，然后局部針對性用藥，而無需在整個(gè)牙周袋內(nèi)達(dá)到高濃度。這是甲殼胺做為緩釋控釋制劑的特性。

　　甲殼胺對變形鏈球菌有解吸附作用，這就彌補(bǔ)了黃對鏈球菌抑菌作用不甚理想的缺點(diǎn)，使變形鏈球菌從牙面上脫落，抑制了菌斑在牙面上的附著。變形鏈球菌是牙頸部齦上菌斑的重要組成，而齦上菌斑的存在又為齦下菌斑的形成創(chuàng)造條件。所以，消除齦上菌斑是防止齦下菌斑形成的前提，甲殼胺對變形鏈球菌的吸附作用，正是抑制齦上菌斑的形成，這就不利于牙周病的發(fā)生。實(shí)際上，甲殼胺對變形鏈球菌的解吸附作用和凝集作用是相輔相承的。

　　黃酸標(biāo)準(zhǔn)品和黃總蒽醌的抑菌作用致相同，但黃酸標(biāo)準(zhǔn)品提煉困難，價(jià)格昂貴。考慮到黃酸提取過程的復(fù)雜性和患者對藥物價(jià)格的接受能力，我們用黃總蒽醌代替黃酸標(biāo)準(zhǔn)品做為抑菌劑，甲殼胺為輔料，制成黃滴劑，體外抑菌實(shí)驗(yàn)證明對口腔常見菌均有抑制作用。

　　綜上，黃滴劑經(jīng)實(shí)驗(yàn)室研究證明有明顯抑菌作用，還有待于進(jìn)一步觀察其臨床療效。

　　參考文獻(xiàn)

　　［1］肖曉蓉著。口腔微生物學(xué)及實(shí)用技術(shù)。北京：北京醫(yī)科學(xué)中國協(xié)和醫(yī)科學(xué)聯(lián)合出版社，1993，163。

　　［2］王文風(fēng)等。黃的生休研究。蒽醌衍生物抗厭氧菌的實(shí)驗(yàn)研究。中國藥科學(xué)學(xué)報(bào)，1990，21（6）：354～357。

　　［3］羅明生，高天惠主編。藥劑輔料全。成都：四川科技出版社，1993，319。