口腔大黃滴劑的實驗研究
發布時間：2011-10-18 共1頁
摘 要：目的：研制一種新型有效的牙周抗菌制劑，以代替常規用藥。方法：用瓊脂稀釋法做幾種口腔常見菌對黃總蒽醌和黃酸標準品的敏感性試驗。甲殼胺對口腔常見菌的凝集試驗。用齲活性試驗做甲殼胺對變形鏈球菌的解吸附試驗。用鋼管法做黃滴劑對口腔常見菌的抑菌試驗。結果：黃總蒽醌和黃酸標準品對口腔常見菌都有不同程度的抑菌作用。甲殼胺除對齒雙歧外，對其他口腔常見菌均有凝集作用。甲殼胺對變形鏈球菌有解吸附作用。成品黃滴劑對口腔常見菌有抑菌作用。結論：黃滴劑有明顯抑菌作用。
牙周病是由牙菌斑引起的牙齒周圍組織的慢性破壞性疾病，選擇有效的抗菌藥物控制引起牙周病的菌斑，收到明顯療效。但目前治療牙周病的抗菌藥物多局限于抗生素類的化學制劑，而對中藥的研究甚少。我們利用中藥黃的明顯抗厭氧菌作用和甲殼胺配伍制成中藥黃滴劑，旨在提出一種新的考試，網站收集牙周抗菌制劑。現就其主要實驗室研究報告如下。
1.材料與方法
1.1 標準菌株和培養條件
1.1.1 標準菌株 選用北京口腔醫學研究所微生物室保存的國際標準菌株。牙齦卟啉菌P381和ATCC33277，粘性放線菌ATCC19246，中間型普氏菌ATCC25261，具核梭形菌ATCC10953，伴放線放線桿菌Y4，變形鏈球菌c型和d型，中間型鏈球菌ATCC27335，齒雙歧ATCC27534.
1.1.2 培養條件 變形鏈球菌和中間型鏈球菌在MSA培養基中微需氧培養2天，余菌株在CDC培養基中厭氧培養5天。
1.2 主要試劑
1.2.1 黃總蒽醌 北京制藥研究所提供。
1.2.2 黃酸標準品 中國藥品生物制品檢定所，0757-9703。
1.2.3 甲殼胺 取比度0.78粘度45cps灰分0.8%。
1.2.4 黃滴劑 北京口腔醫院藥房配制。
1.3 實驗方法
1.3.1 黃對牙周致病菌的抑菌試驗 取黃總蒽醌和黃酸標準品，用瓊脂稀釋法［1］做細菌敏感性試驗。
1.3.2 甲殼胺的凝集試驗 將各菌接種在相應的液體培養基中，內含一定濃度的甲殼胺，培養后觀察各菌生長情況。
1.3.3 甲殼胺對變形鏈球菌的解吸附試驗 用齲活性試驗方法，將標準板浸入含變形鏈球菌的液體培養基中，經48小時培養后，將有變形鏈球菌附著的板再浸到含甲殼胺的溶液中，連續觀察附著的變形鏈球菌從板上的脫落情況。
1.3.4 黃滴劑的體外抑菌實驗 取成品黃滴劑，按倍比稀釋的原則，稀釋為原液的100%、50%、25%、12.5%和6.25%用鋼管法分別加入到各菌的菌平皿中，培養后觀察抑菌結果。
2.結 果
2.1 黃抑菌試驗測定結果 黃總蒽醌和黃酸標準品的抑菌效果致相同，除對變形鏈球菌、中間型鏈球菌和伴放線放線桿菌無作用外，對口腔其他常見菌均有作用。對牙齦卟啉菌ATCC33277和中間型普氏菌ATCC25261作用最強，黃總蒽醌濃度在1.4μg/ml，黃酸標準品濃度在4.17μg/ml時都有抑菌作用。
2.2 甲殼胺凝集結果 甲殼胺除對齒雙歧ATCC27534無凝集作用外，對口腔其他常見菌都有不同程度的凝集作用。
2.3 甲殼胺解吸附試驗結果 甲殼胺對附著的變形鏈球考試，網站收集菌有一定解吸附作用，這一作用的最有效濃度是5mg/ml。應用甲殼胺后10min開始起作用，60min后使附著的變形鏈球菌完全脫盡。
2.4 黃滴劑的體外抑菌實驗結果 黃滴劑對口腔常見菌有明顯抑菌作用，即使稀釋至原液的1/16仍有作用。
3.討 論
在我國應用黃治療疾病已有悠久的歷史。黃有廣譜抗菌作用，黃中起抗菌作用的有效成分為蒽醌衍生物，而蒽醌衍生物中有抑菌作用的成分為黃酸、黃素和蘆薈黃素。王文風等［2］報告，黃蒽醌衍生物對臨床常見的100株厭氧菌有較強的抑制作用。我們利用黃的明顯抗厭氧菌作用，尤其是對脆弱類桿菌、產黑色素類桿菌敏感的特性，制成中藥抗菌藥物，治療牙周疾病。
用瓊脂稀釋法做幾種口腔常見菌對黃總蒽醌和黃酸標準品的敏感性，發現二者的抑菌效果基本相同，對牙周致病菌都有不同程度的抑制作用，尤其是對牙齦卟啉菌ATCC33277和中間型普氏菌ATCC25261，即使濃度在1.4μg/ml都有抑菌作用。但黃對變形鏈球菌、中間型鏈球菌和伴放線放線桿菌無抑菌作用，說明對由伴放線放線桿菌引起的青少年牙周炎可能無作用，而對厭氧菌引起的牙周炎作用較好。
甲殼胺做為一種生物多糖高分子物質，因其可溶性、成膜性、可吸收性和生物相容性，在藥劑中作為填充劑、黏合劑、薄膜包衣材料、緩釋控釋材料等在醫學上研究很多［3］。近年來，在口腔方面的應用也漸漸受到重視。甲殼胺除對齒雙歧無凝集作用外，對其他口腔常見菌均有凝集作用。這樣，甲殼胺就可把牙周袋內的細菌凝集沉淀在牙周袋的局部，然后局部針對性用藥，而無需在整個牙周袋內達到高濃度。這是甲殼胺做為緩釋控釋制劑的特性。
甲殼胺對變形鏈球菌有解吸附作用，這就彌補了黃對鏈球菌抑菌作用不甚理想的缺點，使變形鏈球菌從牙面上脫落，抑制了菌斑在牙面上的附著。變形鏈球菌是牙頸部齦上菌斑的重要組成，而齦上菌斑的存在又為齦下菌斑的形成創造條件。所以，消除齦上菌斑是防止齦下菌斑形成的前提，甲殼胺對變形鏈球菌的吸附作用，正是抑制齦上菌斑的形成，這就不利于牙周病的發生。實際上，甲殼胺對變形鏈球菌的解吸附作用和凝集作用是相輔相承的。
黃酸標準品和黃總蒽醌的抑菌作用致相同，但黃酸標準品提煉困難，價格昂貴。考慮到黃酸提取過程的復雜性和患者對藥物價格的接受能力，我們用黃總蒽醌代替黃酸標準品做為抑菌劑，甲殼胺為輔料，制成黃滴劑，體外抑菌實驗證明對口腔常見菌均有抑制作用。
綜上，黃滴劑經實驗室研究證明有明顯抑菌作用，還有待于進一步觀察其臨床療效。
參考文獻
［1］肖曉蓉著。口腔微生物學及實用技術。北京：北京醫科學中國協和醫科學聯合出版社，1993，163。
［2］王文風等。黃的生休研究。蒽醌衍生物抗厭氧菌的實驗研究。中國藥科學學報，1990，21（6）：354～357。
［3］羅明生，高天惠主編。藥劑輔料全。成都：四川科技出版社，1993，319。
