發(fā)布時(shí)間:2014-12-29 共2頁
● 冰凍斷裂(freeze fracture)法 冰凍斷裂法不僅可用于研究膜組份分布的不對(duì)稱,也是膜的脂雙層結(jié)構(gòu)的直接證據(jù)的來源(圖3-33)。
圖3-33 冰凍斷裂技術(shù)顯示的脂雙層及膜蛋白分布的不對(duì)稱性
● 放射性標(biāo)記法(radioactive labeling procedure)
實(shí)驗(yàn)中首先要分離細(xì)胞膜,然后用乳過氧化物酶進(jìn)行膜蛋白標(biāo)記。過氧化物酶的分子較而不能透過細(xì)胞膜,這樣可以用于標(biāo)記膜外表面的蛋白,標(biāo)記后,分離膜蛋白,電泳分離和放射自顯影進(jìn)行鑒定。
圖3-34 放射性標(biāo)記法測(cè)定膜蛋白分布的不對(duì)稱性
在酶法標(biāo)記測(cè)定膜蛋白的定向?qū)嶒?yàn)中若是要標(biāo)記膜內(nèi)側(cè)的蛋白,該如何處理?
● 脂酶處理法 既可以用胰蛋白酶處理法研究膜蛋白的定位,也可以用磷脂酶處理法來研究膜脂在脂雙層中的定位(圖3-35)。
圖3-35 用脂酶處理法研究膜脂分布的不對(duì)稱性