②等電點(diǎn)(pI)
蛋白質(zhì)以兼性離子狀態(tài)存在時(shí)溶液的pH值即為該蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)。血漿的pH為7.4,而血漿中各種蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)都小于7.4,故在血漿中以陰離子形式存在。
③電泳
蛋白質(zhì)陰、陽離子在電場中分別向正、負(fù)電極移動。這種帶電荷的蛋白質(zhì),在電場中向電性相反的電極移動的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)電泳。電泳的速度與帶電粒子電荷多少、分子的大小、形狀以及電場強(qiáng)度等多種因素有關(guān),故可用電泳法來分離純化、鑒定和制備蛋白質(zhì)。
(2)蛋白質(zhì)的沉淀
①概念:蛋白質(zhì)自溶液中析出的現(xiàn)象稱為沉淀。
②破壞蛋白質(zhì)膠體溶液的兩個(gè)穩(wěn)定因素:顆粒表面的電荷和水化膜,即可使蛋白質(zhì)發(fā)生沉淀。
③常用的方法:
1)鹽析:蛋白質(zhì)溶液中加入大量中性鹽使蛋白質(zhì)沉淀的方法稱為鹽析。常用的中性鹽有硫酸銨、硫酸鈉和氯化鈉等。一般用鹽析法分離出的蛋白質(zhì)不變性,再經(jīng)透析除去鹽,即可得到純化的、保持原活性的蛋白質(zhì)。環(huán)球網(wǎng)校整理
2)有機(jī)溶劑:乙醇、丙酮等極性較強(qiáng)的有機(jī)溶劑加入蛋白質(zhì)溶液中可使蛋白質(zhì)沉淀。
3)重金屬鹽:當(dāng)溶液pH值大于等電點(diǎn)時(shí),蛋白質(zhì)電離成負(fù)離子,可與重金屬離子如Cu2+、Hg2+、Pb2+、Ag+等結(jié)合成不溶性蛋白鹽沉淀。
(3)蛋白質(zhì)的變性
①概念:蛋白質(zhì)在某些理化因素作用下,空間結(jié)構(gòu)發(fā)生改變或破壞,導(dǎo)致某些理化性質(zhì)和生物學(xué)活性發(fā)生改變的現(xiàn)象稱為蛋白質(zhì)的變性作用。
②能使蛋白質(zhì)變性的因素
1)物理因素:加熱、干燥、高壓、煮沸、紫外線、X射線等。
2)化學(xué)因素:強(qiáng)酸、強(qiáng)堿、重金屬鹽、有機(jī)溶劑等。
③蛋白質(zhì)變性的特點(diǎn):
1)生物學(xué)活性喪失。
2)溶解度降低。
3)易被蛋白酶水解。
④蛋白質(zhì)變性的臨床應(yīng)用環(huán)球網(wǎng)校整理
1)消毒滅菌:如酒精、紫外線、加熱、高壓消毒等。
2)采用低溫、避光保存酶、疫苗、免疫血清等。
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